一、哺乳動(dòng)物骨髓細(xì)胞柔色體畸變驗(yàn)

染色體型畸變:染色體結(jié)構(gòu)損傷，表現(xiàn)為在兩個(gè)染色單體的相同位點(diǎn)均出現(xiàn)斷裂或斷烈重組的改變?nèi)旧珕误w型畸變:染色體結(jié)構(gòu)損傷，表現(xiàn)為染色單體斷裂或染色單體斷裂重組的損傷。染色體數(shù)目畸變:哺乳,動(dòng)物細(xì)胞染色體數(shù)目的改變。

二、試驗(yàn)原理

使哺乳動(dòng)物(如大鼠或小鼠)經(jīng)口或其他適宜途徑染毒，動(dòng)物處死前用細(xì)胞分裂中期阻斷劑處理，處死后制備骨髓細(xì)胞染色體標(biāo)本，分析染色體畸變。

本方法特別適用于需考慮體內(nèi)代謝活化后的染色體畸變分析

三、受試物要求

固體受試物需溶解或懸浮于溶劑中。

液體受試物可直接使用或予以稀釋。

四、測(cè)試方法

1.頸椎脫的法處死動(dòng)物，取出股骨，剔除肌肉等組織

2.剪去股骨兩端，注射器5mL生理鹽水從股骨一端注入，10mL離心管從股骨另一端接取流出的骨髓細(xì)胞懸液3.將細(xì)胞懸液以1000r/min 的速度離心5 min-7 min，去除上清液。

4加入0.075mol/L KCI溶液7ml處理

5.加入7mL固定液處理。

6.用混懸液以空氣干燥或火焰干燥法制片。用姬姆薩染液染色

7.計(jì)數(shù)畸變細(xì)胞。

8.結(jié)果評(píng)價(jià):結(jié)構(gòu)畸變細(xì)胞率和每細(xì)胞內(nèi)的染色體暗變數(shù)作為評(píng)價(jià)指標(biāo).陽(yáng)性結(jié)果證明受試物具有引起該種受試動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變的能力陰性結(jié)果表明在本試驗(yàn)條件下受試物不引起該種受試動(dòng)物骨髓細(xì)胞染色體畸變